黃曲霉毒素是黃曲霉在生長繁殖過程中產(chǎn)生的一組有毒代謝產(chǎn)物，黃曲霉毒素主要污染糧食和油料作物，如花生、玉米、大米、棉籽等。黃曲霉毒素對人及動物肝臟組織有破壞作用，嚴重時可導(dǎo)致肝癌甚至死亡。因此國際上對食品中黃曲霉毒素有嚴格的限量要求。
本文采用高效液相熒光檢測器—柱后衍生法對黃曲霉毒素進行測定，通過色譜柱的選擇，流動相配比的優(yōu)化以及檢測器條件的調(diào)整等手段，以期得到黃曲霉毒素的分離效果。
一、實驗方法
Cometro高效液相色譜系統(tǒng)；
熒光檢測器，激發(fā)波長360nm，發(fā)射波長450nm；
Cometro柱后衍生系統(tǒng)，柱后衍生70度，衍生劑：碘的0.03%甲醇水溶液，流速0.3ml/min；
流動相：甲醇-乙腈-水；
流速：0.8ml/min；
色譜柱：多種品牌的十八烷基鍵合硅膠柱；
樣品：黃曲霉毒素儲備液；
二、結(jié)果與分析
1、色譜柱的選型
采用四種不同品牌的C18色譜柱，分別標(biāo)記為進口柱1、進口柱2、進口柱3、Comatex柱。流動相比例為甲醇-乙腈-水=40:18:42，進樣量為10μl，比較其分離效果。
由實驗結(jié)果可以看出，四種不同填料的色譜柱中，Comatex柱的分離效果，但仍然不能得到一個良好的分離度，因此，通過改變流動相的比例來進一步改善分離效果。
2、流動相配比的優(yōu)化
通過上述實驗，選擇分離效果的Comatex柱，調(diào)節(jié)流動相的比例為甲醇-乙腈-水=40:10:50，其他實驗條件不變。
在該條件下，可以得到一個較好的分離效果。
3、檢測器條件的調(diào)整
將工作液稀釋25倍后，進樣量分別為5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，測定樣品的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
噪音大靈敏度低，信噪比、分離度差。
優(yōu)化調(diào)整檢測器條件，使用Comatex C18色譜柱，優(yōu)化流動相，重復(fù)上述實驗。
上述結(jié)果顯示，基線噪音（0.2mv），靈敏度，信噪比（>10），柱效（>9000），主峰之間的分離度（>1.5）。
三、結(jié)論
通過色譜柱的選擇，流動相配比的優(yōu)化，以及燈的能量的調(diào)節(jié)，可以提高分離度，降低噪音，提高靈敏度，得到良好的分離效果。采用高效液相熒光檢測器-柱后衍生法測定黃曲霉毒素，選用Comatex色譜柱；流動相為甲醇-乙腈-水=40:10:50；優(yōu)化檢測器條件，可以得到分離效果。
